| 征求意见稿 |
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| 标准草案 |
标准草案.pdf
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项目申报书 |
项目申报书.pdf
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| 基础信息 |
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| 标准性质 |
国家标准指导性技术文件
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标准类别 |
其他 |
| 制修订 |
制定 |
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| 归口单位 |
全国医用临床检验实验室和体外诊断系统标准化技术委员会 |
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执行单位 |
全国医用临床检验实验室和体外诊断系统标准化技术委员会 |
| 主管部门 |
国家药品监督管理局 |
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| 采标情况 |
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本标准
等同采用
ISO
国际标准：ISO/TS 7552-2:2024。
采标中文名称 ： 分子体外诊断检测 静脉全血中循环肿瘤细胞（CTC）的前处理技术规范 第2部分：分离DNA
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| 起草单位 |
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| 复旦大学附属华山医院 |
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| 目的意义 |
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| 实体瘤可将细胞及生物分析物释放至血液及其他体液中，这一特性为利用体液进行肿瘤检测、诊断与分子特征鉴定的微创手段，即液体活检提供了可能。液体活检在癌症的早期发现与诊断方面展现出显著优势，并有助于推动个体化治疗的发展。
相关应用已成为诊断领域中增长最为迅速的方向之一。
外周静脉血中的循环肿瘤细胞（CTCs）能够反映肿瘤进展过程中的生物学复杂性，因其携带独特的遗传、表观遗传及基因表达特征，已成为重要的生物标志物。
CTC的识别与定量不仅具有预后价值，其分子特征还可用于提升疾病预后评估的准确性、指导治疗决策以及监测治疗后的病情变化。
目前，CTCs被视为反映肿瘤在早期发生、进展及转移过程中组织特征的替代性指标。
通过对CTC分子特征的分析，可为系统性治疗期间的肿瘤基因型动态监测、疾病进展机制解析、新型靶向治疗靶点的发现以及个体化治疗方案的选择提供科学依据。此外，单个CTC的测序技术已成为研究肿瘤基因组异质性的关键工具。分子检测技术如定量PCR（qPCR）、数字PCR（dPCR）以及二代测序（NGS）等方法可用于表征CTC特异性的DNA变异。
然而，CTCs具有较高的脆弱性，在未使用专用稳定剂的情况下，采用常规采血管（如含EDTA的试管）采集样本时，CTCs常在数小时内发生降解。同时，CTCs极为稀有，尤其在疾病早期阶段，其浓度可低至每10 mL血液中少于10个细胞，与白细胞（WBCs）的比例约为1:10？。如此低丰度对CTC的有效富集构成了重大挑战。此外，富集过程中常伴随正常血细胞的共富集，导致CTCs被稀释，进而影响后续检测的灵敏度与准确性，尤其是在检测微小肿瘤克隆时更为显著。
因此，亟需优化富集策略以最大限度减少WBC的共富集，从而确保对CTC特异性遗传与表观遗传改变的高精度检测。
为获得高质量且能真实反映肿瘤突变谱的DNA样本，必须采取有效措施去除白细胞干扰。分析前流程的标准化涵盖从血液采集、样本稳定运输与储存，到CTC富集、分离（如适用）及DNA提取的全过程。该标准化流程对于保障当前临床检测结果的可靠性至关重要，同时也是开发新型CTC基诊断技术并实现其临床转化的基础。 |
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| 范围和主要技术内容 |
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| 1. 适用范围
本文件规定了在进行分子检查前的检查阶段期间，用于检测循环肿瘤细胞（CTCs）DNA分离的静脉全血标本的处理、储存、CTC富集和分离、DNA分离和储存以及文件记录的要求和建议。
本文件适用于分子体外诊断检查，包括医学实验室进行的实验室自建检测，也适用于实验室客户、体外诊断开发商和制造商、生物样本库、开展生物医学研究的机构和商业组织以及监管机构。
本文件不涉及直接从含有CTC的静脉全血中分离基因组DNA，相关要求见ISO 20186-2。
本文件不涉及特定白细胞的分离及其后续基因组DNA提取，也不涵盖活性循环肿瘤细胞（CTC）冷冻保存与培养所需的预分析工作流程要求。
注1：本文件所述要求亦适用于其他循环罕见细胞(例如胚胎细胞）。
注2：国际、国家或地区法规及要求可能对本文件涉及的具体主题具有约束力。
2. 主要技术内容
该文档规定了从静脉全血中分离循环肿瘤细胞（CTCs）DNA的检测前流程技术要求，涵盖标本采集、保存、运输、CTC富集与分离、DNA提取及储存等关键步骤的标准化操作。重点强调使用含稳定剂采血管、避免交叉污染和确保DNA质量，以支持后续分子检测的准确性和可靠性。 |
